Optimización de la producción del antígeno recombinante VP2 del Protoparvovirus carnivoro 1 en Escherichia coli
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Date
2025-01-09
Authors
Journal Title
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Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Carnivorous protoparvovirus 1 is the viral species currently assigned to the causal agent of canine parvovirosis, a common disease in puppies and for which several clinical forms have been described, including hemorrhagic gastroenteritis, myocarditis, cerebellar hypoplasia, cerebelitis or encephalitis. The ability to immediately detect the disease in puppies is important for the prevention and control of the disease. Biotechnological tools allow the development of assays for the detection and control of the disease, so in the present study the production of virion-like particles was implemented, using a bacterial expression model; in which the culture conditions were identified, and then the purification and formation of viral pseudoparticles were optimized. A hemagglutination and hemagglutination inhibition assay was then applied to demonstrate the formation of virion-like particles. Finally, the hemagglutination inhibition assay allowed a comparison of the presence of antibodies in patients immunized with viral antigen versus patients who recovered from the disease; demonstrating the usefulness of virion-like particles to demonstrate the presence of antibodies, which, in these two contrasted groups, no significant differences were found (p > 0.05). Therefore, for future research it will be important to study with the use of virion-like particles, among other variables, the immunological status of patients recovered from infections by existing viral variants that can infect canines.
Resumen
Protoparvovirus carnivoro 1 es la especie viral a la que actualmente se asigna el agente causal de la Parvovirosis canina, enfermedad común en cachorros y de la que se han descrito varias formas clínicas, en las que se encuentran gastroenteritis hemorrágica, miocarditis, hipoplasia cerebelar, cerebelitis o encefalitis. La capacidad para detectar de manera inmediata la enfermedad en los cachorros es importante para la prevención y el control de la enfermedad. Las herramientas biotecnológicas permiten el desarrollo de ensayos para la detección y control de la enfermedad, por lo que en el presente estudio se implementó la producción de partículas similares a viriones, con el uso de un modelo de expresión bacteriano; en lo cual se identificó las condiciones de cultivo, posteriormente se optimizó la purificación y formación de pseudopartículas virales. A continuación, se aplicó un ensayo de hemaglutinación e inhibición de la hemaglutinación para evidenciar la formación de las partículas similares a viriones. Finalmente, el ensayo de inhibición de la hemaglutinación permitió realizar una comparación de la presencia de anticuerpos en pacientes inmunizados con antígeno viral frente a pacientes que se recuperaron de la enfermedad; evidenciándose la utilidad de las partículas similares a viriones para demostrar la presencia de anticuerpos, los cuales, en estos dos grupos contrastados no se encontraron diferencias significativas (p > 0.05). Por lo que para futuras investigaciones será importante estudiar con el uso de las partículas similares a viriones, entre otras variables, el estatus inmunológico de los pacientes recuperados de las infecciones por las variantes virales existentes que puedan infectar a los caninos.
Keywords
Pseudopartícula viral, Protoparvovirus carnívoro, Biotecnología
Citation
Código de tesis
TV; 536
Código de tesis
Grado Académico
Medico Veterinario Zootecnista