Producción de la proteína p24 recombinante para la inmunodetección de Leucosis viral bovina
Loading...
Date
2024-10-28
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Bovine leukosis is a chronic pathology with limited clinical manifestation, whose main lesions
correspond to the development of neoplasias and immunosuppression, caused by the
infection of the Bovine leukemia virus (BoLV), this is a Retrovirus which is transmitted
horizontally, by direct contact between healthy animals with fluids from infected animals,
mechanically through vectors, such as hematophagous insects, iatrogenically and vertically
through the transplacental route, which occurs in a lower percentage. This disease has been
described in Ecuador, however there is no data on the frequency and economic impact of
the disease in the bovine industry. One of the limitations for the application of disease
control and elimination measures in affected herds focuses on the limited availability of
diagnostic tools that allow the identification of affected animals. The identification of animals
exposed to BoLV and potentially infected is based on the detection of antibodies that
recognize structural antigens, therefore the objective of this work was to produce the
recombinant antigen p24 in a bacterial expression model based on Escherichia coli and
evaluate its recognition by antibodies with the use of sera from animals considered
seropositive to BoLV using indirect ELISA assays. The p24 antigen was selected because it
is one of the proteins found in greatest quantity in the retrovirus capsid, mediating the
packaging of the RNA genome, and is considered a useful antigen for diagnosis because it
shows a strong capacity to induce immune response. As a result, it was possible to obtain
the recombinant p24 antigen in pure form in the bacterial expression model, obtaining an
estimated yield of 4,87 mg/l, and which was recognized by the antibodies present in serum
samples from seropositive bovines
Resumen
La Leucosis viral bovina es una patología crónica principalmente subclínica, cuyas
principales lesiones corresponde al desarrollo de neoplasias e inmunosupresión, causadas
por la infección del Virus de leucemia bovina (BoLV), éste es un Retrovirus el cual se
transmite de manera horizontal, por contacto directo entre animales sanos con fluidos
principalmente sangre de animales infectados, de forma mecánica mediante vectores, como
insectos hematófagos, por vía iatrogénica y vertical por vía transplacentaria, la cual ocurre
en menor porcentaje. Esta enfermedad se ha descrito en el Ecuador, sin embargo, no se
cuenta con datos sobre la frecuencia y el impacto económico de la enfermedad en la
industria bovina. Una de las limitantes para la aplicación de medidas de control y
eliminación de la enfermedad en los hatos afectados se centra en la poca disponibilidad de
herramientas diagnóstica que permita la identificación de los animales afectados. La
identificación de los animales expuestos al BoLV y potencialmente infectados se basa en la
detección de anticuerpos que reconocen antígenos estructurales, por ello el objeto de este
trabajo correspondió a producir el antígeno recombinante p24 en un modelo de expresión
bacteriano basado en Escherichia coli y evaluar su reconocimiento por anticuerpos con el
uso de sueros de animales considerados seropositivos al BoLV mediante ensayos de ELISA
indirecto. El antígeno p24 se seleccionó por ser una de las proteínas que se encuentra en
mayor cantidad en la cápside del retrovirus, mediando el empacado del genoma de ARN, y
es considerada como un antígeno útil para el diagnóstico debido a que muestra una fuerte
capacidad para inducir respuesta inmune. Como resultado se logró obtener el antígeno
recombinante p24 en forma pura en el modelo de expresión bacteriano, obteniendo un
rendimiento estimado de 4,87 mg/l, y el cual fue reconocido por los anticuerpos presentes
en muestras de suero de bovinos seropositivos
Keywords
Medicina Veterinaria, Enfermedades, Virus
Citation
Código de tesis
TV;527
Código de tesis
Grado Académico
Medico Veterinario Zootecnista