Establecimiento de cultivos primarios de células endometriales y oviductales bovinas
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Date
2024-08-05
Authors
Journal Title
Journal ISSN
Volume Title
Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Currently, primary cell cultures are widely used for various research purposes, thereby
reducing the reliance on laboratory animals. The aim of this investigation is to develop a
standard protocol for primary cell culture of bovine endometrial and oviductal cells suitable for
the conditions of the School of Agricultural Science labs at Universidad de Cuenca. We utilized
endometrial and oviductal bovine cells, subjecting them to different treatments including
modifications to their culture medium such as bovine fetal serum (BFS), pyruvate, and
antibiotics. A total of 5 uteri in the luteal phase were collected, from which cells were extracted
for endometrial cultures (n=12) and oviductal cultures (n=12). Endometrial cells were cultured
for 14 days, while oviductal cells were cultured for 8 days. Analyses including assessment of
confluence, cellular vitality, and well contamination were conducted on specified days using
vital staining and Gram staining. However, observation and culture medium changes were
performed every 48 hours. The results indicated the influence of the applied treatments on
cellular vitality for both endometrial and oviductal cells (p < 0.05). While cellular confluence
and well contamination in endometrial cell cultures were not affected by the treatments applied
(p > 0.05), confluence and well contamination in oviductal cells exhibited statistical differences
among treatments (p < 0.05). In summary, an initial assay of a cell culture protocol was
successfully conducted under the conditions of the Agricultural School laboratory. However,
further refinement of this technique is necessary to enable the pursuit of more complex
research inquiries using primary cell culture methods
Resumen
Los cultivos celulares primarios son ampliamente usados en la actualidad para el desarrollo
de diferentes investigaciones, de modo que se puede prescindir de animales de laboratorio.
Bajo esta perspectiva el propósito de esta investigación fue la implementación de un protocolo
estándar de cultivo celular primario de células endometriales y oviductales bovinas que se
pueda instaurar bajo las condiciones del laboratorio de inmunología de la Facultad de
Ciencias Agropecuarias de la Universidad de Cuenca. Se usaron células endometriales y
oviductales bovinas, estas células se expusieron a tratamientos donde se varió sus medios
de cultivo, la concentración de sustancias como el suero fetal bovino (SFB), Piruvato y
antibióticos. Se recolectó un total de 5 úteros en fase luteal, de los cuales se extrajo células
para realizar los cultivos endometriales (n = 12) y oviductales (n = 12). Las células
endometriales se cultivaron durante 14 días, mientras que las oviductales se cultivaron
durante 8 días; la medición de confluencia, vitalidad celular y contaminación de pocillos, se
realizaron en los días ya mencionados, mediante el uso de tinciones vitales y tinción de Gram.
Sin embargo, la observación y cambio de medio de cultivo se llevó a cabo cada 48 horas. Los
hallazgos indicaron que hubo influencia de los tratamientos en la vitalidad celular para las
células endometriales y oviductales (p < 0,05). La confluencia celular y contaminación de
pocillos en los cultivos de células endometriales no se vio influenciada por los tratamientos a
los cuales fueron expuestas (p > 0,05). Por el contrario, la confluencia y contaminación de
pocillos, de las células oviductales presentó diferencias estadísticas significativas entre
tratamientos (p < 0,05). En síntesis, se consiguió un primer ensayo exitoso de un protocolo
de cultivo celular primario bajo las condiciones del laboratorio de la facultad, a pesar de ello,
se debe continuar perfeccionando la técnica de modo que se puedan plantear investigaciones
más complejas usando métodos de cultivo celular primario.
Keywords
Medicina Veterinaria, Bovinos, Cultivo de células, Endometrio
Citation
Código de tesis
TV;508
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario