Evaluación del reconocimiento del antígeno IalB de Bartonella hanselae por anticuerpos de caninos (Canis lupus familiaris)
Date
2025-09-30
Journal Title
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Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Bartonella henselae (B. henselae), a Gram-negative bacterium responsible for bartonellosis, is a chronic disease that affects both animals and humans. In this context, cats (Felis catus domesticus) are the main carriers, and the disease is transmitted through their fleas (Ctenocephalides felis). In dogs, infection with this bacterium often does not induce the appearance of obvious clinical signs, which complicates its diagnosis at points of care. In addition, there are few diagnostic tools available to identify chronically infected animals. A possible indicator for detecting this infection in dogs (Canis lupus familiaris) is the IalB antigen, a protein found in the outer membrane of B. henselae. Therefore, the objective of this study was to evaluate the possible recognition of IalB by antibodies in dogs potentially exposed to B. henselae in the city of Cuenca, Ecuador. To achieve this objective, an indirect enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) was performed, using the recombinant IalB protein as the antigen together with a modified version of the same by adding a polystyrene-binding peptide. This assay was carried out on two types of plates. In the indirect ELISA assay, 92 canine sera were evaluated, in which the presence of fleas had been reported in a previous three-month period. MultiSorp and MaxiSorp plates were used for the analysis, and statistical tests were applied to compare reactivity. The Friedman test showed that, in the MultiSorp plates, there were no significant differences between the two antigens, indicating equivalent reactivity. However, in the MaxiSorp plates, lower antibody binding was observed. In addition, a high correlation between IalB and IalB-PoBP was evident in MultiSorp (ρ = 0.87; p < 0.0001), while a moderate correlation was observed in MaxiSorp (ρ = 0.65), suggesting that fusion to the peptide does not substantially alter recognition. Finally, no correlation was found between the presence of fleas and antibody detection (ρ ≈ 0.0; p > 0.7), which could be attributed to limitations in risk assessment based on medical history and physical examination.
Resumen
La Bartonella henselae (B. henselae), una bacteria Gram negativa responsable de la bartonelosis, es una enfermedad de curso crónico que afecta tanto a animales como a humanos. En este contexto, los felinos (Felis catus domesticus) son los principales portadores, y la enfermedad se transmite a través de sus pulgas (Ctenocephalides felis). En los perros, la infección por esta bacteria a menudo no induce la aparición de signos clínicos evidentes, lo que complica su diagnóstico en los puntos de atención. Además, existe poca disponibilidad de herramientas de diagnóstico para identificar a los animales infectados de manera crónica. Un posible indicador para detectar esta infección en los caninos (Canis lupus familiaris) es el antígeno IalB, una proteína que se encuentra en la membrana externa de B. henselae. Por lo anterior, el objetivo de este trabajo fue evaluar el posible reconocimiento de IalB por anticuerpos en la especie canina potencialmente expuestos a B. henselae, en la ciudad de Cuenca, Ecuador. Para alcanzar este objetivo, se realizó un ensayo de inmunoadsorción asociado a enzimas (ELISA) indirecto, empleando como antígeno la proteína recombinante IalB junto a una versión modificada de la misma por la adición de un péptido de unión a poliestireno. Este ensayo se llevó a cabo en dos tipos de placas. En el ensayo ELISA indirecto se evaluaron 92 sueros de caninos, en los cuales se reportó la presencia de pulgas en un periodo previo de tres meses. Para el análisis, se emplearon placas MultiSorp y MaxiSorp, y se aplicaron pruebas estadísticas para comparar la reactividad. La prueba de Friedman mostró que, en las placas MultiSorp, no hubo diferencias significativas entre ambos antígenos, lo que indicó una reactividad equivalente. Sin embargo, en las placas MaxiSorp se observó una menor unión de anticuerpos. Además, se evidenció una alta correlación entre IalB e IalB-PoBP en MultiSorp (ρ = 0,87; p < 0,0001), mientras que en MaxiSorp se observó una correlación moderada (ρ = 0,65), lo que sugiere que la fusión al péptido no altera sustancialmente el reconocimiento. Finalmente, no se encontró correlación entre la presencia de pulgas y la detección de anticuerpos (ρ ≈ 0,0; p > 0,7), lo cual podría atribuirse a limitaciones en la evaluación del riesgo basada en la anamnesis y el examen físico.
Keywords
Medicina Veterinaria, Caninos, Pulgas
Citation
Código de tesis
TV; 614
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario Zootecnista