Identificación de los alelos del Nramp1 asociados a la resistencia a Leishmaniasis en caninos (Canis lupus familiaris) mediante ARMS-PCR
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Date
2025-08-26
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Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Canine Leishmaniasis is a zoonotic disease of great public health importance, especially in endemic areas such as Ecuador. Previous studies have shown that the Nramp1 gene plays a crucial role in resistance and susceptibility to intracellular diseases through macrophage regulation. This study aimed to identify Nramp1 alleles associated with resistance in canines (Canis lupus familiaris) from urban and rural areas of Cuenca, using the ARMS-PCR technique. Eighty-five DNA samples were processed, designing specific primers for the A4549G (intron 6), C4859T (exon 8), and C8542T (intron 13) polymorphisms. Of these, only the A4549G allele was successfully amplified, revealing a genotypic distribution of 89.41% AA homozygotes (associated with susceptibility) and 10.59% GA heterozygotes (partial resistance); no GG homozygotes were detected. The results indicate that the G allele in A4549G could be linked to some degree of protection against Leishmania spp., although its low frequency (4.71%) suggests limited selective pressure within the studied population. The ARMS-PCR technique proved to be efficient for genotyping this SNP, although conditions had to be adjusted for other polymorphisms.
Resumen
La Leishmaniasis canina, es una enfermedad zoonótica de gran importancia en la salud pública, especialmente en zonas endémicas como Ecuador. Estudios previos han demostrado que el gen Nramp1 juega un rol crucial en la resistencia y susceptibilidad a enfermedades causadas por patógenos intracelulares mediante la regulación de la actividad macrofágica. Esta investigación tuvo como objetivo identificar locus de Nramp1 asociados a resistencia en caninos (Canis lupus familiaris) procedentes de zonas urbanas y rurales de Cuenca, empleando la técnica ARMS-PCR, para la cual se diseñaron cebadores específicos para los polimorfismos A4549G (intrón 6), C4859T (exón 8) y C8542T (intrón 13) del Nramp1. posterior al ajuste del ajuste de las condiciones del ensayo ARMS-PCR, se procedió al análisis de 85 muestras de ADN. Como resultado, únicamente el locus A4549G logró amplificarse exitosamente, revelando una distribución genotípica de 89.41 % homocigotos AA (asociados a susceptibilidad) y 10.59 % heterocigotos GA (resistencia parcial), no se detectaron homocigotos GG vinculado a susceptibilidad. Los resultados indican que el alelo G en A4549G podría estar vinculado con un cierto grado de protección contra Leishmania spp Leishmania spp., aunque su baja frecuencia (4.71 %) sugiere una limitada presión selectiva dentro de la población estudiada. La técnica ARMS-PCR demostró ser eficiente para genotipar este SNP, aunque fue necesario ajustar las condiciones para los otros locus.
Keywords
Medicina Veterinaria, Caninos, Gen
Citation
Código de tesis
TV; 602
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario