Efecto de la proteína recombinante de choque térmico HSPA1A en la crioresistencia de espermatozoides ovinos
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Date
2026-01-29
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Publisher
Universidad de Cuenca. Facultad de Ciencias Agropecuarias
Abstract
Heat shock proteins (HSPs) act as molecular chaperones under thermal stress, protecting cellular membrane integrity. This study evaluated the effect of recombinant HSPA1A on the cryoresistance of cryopreserved ovine spermatozoa. In the first experiment, nine ejaculates from three rams (3 per male) were used to determine the optimal HSPA1A concentration (0–45 μg/ml) supplemented to the TEST extender (Tris, TES, glucose and egg yolk). The concentration of 30 μg/ml HSPA1A increased beat cross frequency (BCF) and amplitude of lateral head displacement (ALH) after 96 h of storage at 5°C compared with the control (P < 0.05). In the second experiment, fifteen ejaculates from three rams (5 per male) were diluted in TEST + 5% glycerol, supplemented either with 0 μg/ml (Control) or 30 μg/ml HSPA1A (HSPA1A-30), and frozen in liquid nitrogen vapour. Samples from the HSPA1A-30 group showed significantly higher straight-line and curvilinear velocities, BCF and acrosomal integrity than the control (p < 0.05). In addition, DNA fragmentation was significantly reduced in samples frozen with HSPA1A-30 (p < 0.05). Finally, cryoresistance indices for motility and acrosomal integrity were significantly increased (p < 0.05) by the addition of HSPA1A-30. In conclusion, supplementation of HSPA1A at 30 μg/ml to the freezing medium improved sperm kinematics and acrosomal integrity and reduced DNA fragmentation in ovine spermatozoa.
Resumen
Las proteínas de choque térmico (HSP) actúan como chaperonas moleculares en condiciones de estrés térmico protegiendo la integridad de las membranas celulares. Esta investigación evaluó el efecto de la proteína recombinante HSPA1A en la crioresistencia de espermatozoides ovinos criopreservados. En un primer experimento, se usó 9 eyaculados de 3 carneros (3 / macho) y se determinó que la concentración de 30 μg/ml (entre 0 y 45) de HPSA1A suplementada al diluyente TEST (Tris, Tes, Glucosa y Yema de huevo), incrementó la frecuencia de batido (BCF) y amplitud del desplazamiento de la cabeza (ALH) a las 96 horas de refrigeración a 5oC comparadas frente al control (p < 0,05). En un segundo experimento, se usó 15 eyaculados de 3 carneros (5 / macho), se diluyeron con TEST + 5 % de Glicerol, suplementado con 0 (Control) 30 μg/ml de HSPA1A (HSPA1A-30) y se congelaron en vapores de Nitrógeno líquido. Las muestras de HSPA1A-30 incrementaron significativamente las velocidades (rectilínea y curvilínea), la BCF y la integridad acrosomal frente a su control (p < 0,05). Asimismo, se evidenció una reducción significativa de la fragmentación de ADN en muestras congeladas con HSPA1A-30 (p < 0,05). Finalmente, se encontró que los índices de crioresistencia para motilidad e integridad acrosomal incrementaron significativamente (p < 0,05) con la adición de HSPA1A-30. En conclusión, la suplementación de la HSPA1A a una concentración 30 μg/ml al medio de congelación mejoró la cinética espermática, la integridad acrosomal y redujo la fragmentación de ADN.
Keywords
Medicina Veterinaria, Calidad espermática, Semen de carnero
Citation
Código de tesis
TV; 618
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario Zootecnista