Evaluación de dos métodos de vitrificación sobre la criopreservación de embriones bovinos producidos in vitro
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Date
2025-03-27
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Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
The present study aimed to assess the efficacy of two vitrification media developed in the laboratory compared to a commercial product for the cryopreservation of bovine embryos. Re-expansion and hatching percentage were evaluated after warming the embryos. A total of 335 blastocysts were randomly assigned to three treatment groups, after going through the maturation, fertilization and in vitro culture process. The assigned blastocysts were selected for their excellent quality; the embryo had to be symmetrical, uniform, spherical, with intact zona pellucida and in accordance with the expected stage of development. Three treatments were established: T1 = (VIT-4M), T2 = (VIT-10M) and T3 = (Control). Each vitrification medium differed in the composition of the stabilization and vitrification solutions, as well as the exposure time of the embryos to these solutions. The results showed similar percentages (P> 0.05) in the re-expansion rate at 24 hours, with values that fluctuated between 26 and 34%. The hatching % of T1 and T2 were similar; however, T2 showed lower values than the control (P < 0.05). It is worth mentioning that the control treatment presented the highest re-expansion and hatching rate at 72 hours post-heating, followed by the 4M treatment with a shorter exposure time, which also presented a significantly higher hatching rate at 72 hours post-heating compared to the 10M treatment, which showed the lowest rates in both parameters. In conclusion, the results of this study indicated that the time that embryos remained in solution before being vitrified directly influenced hatchability after warming. Shorter exposure time to cryoprotectants was associated with higher hatching rates, suggesting that prolonged exposure times may cause stress to embryos and affect their development.
Resumen
El presente estudio tuvo como objetivo valorar la eficacia de dos medios de vitrificación desarrollados en el laboratorio de Biotecnología de la Reproducción Animal de la Universidad de Cuenca en comparación con un producto comercial para la criopreservación de embriones bovinos. Se evaluó la reexpansión y el porcentaje de eclosión después del calentamiento de los embriones. Un total de 335 blastocistos fueron asignados de forma aleatoria a tres grupos de tratamiento, luego de pasar por el proceso de maduración, fecundación y cultivo in vitro. Los blastocistos asignados fueron seleccionados por su calidad excelente, el embrión debía ser simétrico, uniforme, esférico, con zona pelúcida intacta y acorde a la etapa de desarrollo esperada. Se establecieron tres tratamientos T1=(VIT-4M), T2=(VIT-10M) y T3=(Control) cada medio de vitrificación se diferenció en la composición de las soluciones de estabilización y vitrificación, así como el tiempo de exposición de los embriones a estas soluciones. Los resultados mostraron porcentajes similares (P>0,05) en la tasa de reexpansión a las 24 horas, con valores que fluctuaron entre 26 y 34%. El % de eclosión de T1 y T2 fueron similares; sin embargo, T2 mostró valores menores que el control (P<0,05). Cabe mencionar que el tratamiento control presentó la mayor tasa de reexpansión y eclosión a las 72 horas post–calentamiento seguido del tratamiento 4M con un tiempo de exposición más corto también presentó una tasa de eclosión significativamente mayor a las 72 horas post–calentamiento en comparación con el tratamiento 10M que mostró las tasas más bajas en ambos parámetros. En conclusión, los resultados de este estudio indicaron que el tiempo que los embriones permanecieron en la solución antes de ser vitrificados influyeron directamente en la capacidad de eclosión después del calentamiento. Un tiempo de exposición más corto a los crioprotectores se asoció con mayores tasas de eclosión, sugiriendo que tiempos prolongados de exposición pueden generar estrés en los embriones y afectar su desarrollo.
Keywords
Medicina Veterinaria, Bovinos, Blastocistos, Vitrificación
Citation
Código de tesis
TV; 567
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario Zootecnista