La presencia de un cuerpo lúteo activo modifica la tasa de maduración pero no afecta la morfometría de los ovocitos bovinos

Abstract

En la actualidad, la información publicada sobre la influencia que tiene un cuerpo lúteo activo o funcional sobre la capacidad de maduración y morfometría de los ovocitos bovinos presentan aún discrepancias. Se estableció como objetivo de investigación determinar el efecto de la presencia de un cuerpo lúteo activo sobre la tasa de maduración y la morfometría de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero. El estudio se llevó a cabo en el Laboratorio de Biotecnología de la Reproducción Animal de la Universidad de Cuenca, Ecuador. Se colectaron ovarios con cuerpo lúteo activo o funcional (CCL; n=30) y sin estructura lútea alguna (SCL; n=60) del matadero municipal de la ciudad de Cuenca. Con una jeringa desechable y una aguja calibre 18x1.5 pulgadas se puncionaron todos los folículos antrales de 2-8mm de cada ovario. Posteriormente, del líquido folicular obtenido se recuperaron y seleccionaron los mejores complejos cúmulos ovocitos (Coc’s) de cada grupo de ovarios: CCL (n=242) y SCL (n=523), los cuales fueron incubados por 24hs en un medio de maduración a base de TCM199, suero fetal bovino, FSH-p, estradiol, piruvato de sodio, L-glutamina y gentamicina en una estufa con 5% de CO2, 38.5°C y 90%rh. Luego de madurados, los Coc´s fueron denudados por pipeteo en una solución de hialuronidasa 0.1% (p/v) e inmediatamente teñidos con Hoechst 33342 y observados en un microscopio de fluorescencia. Aquellos que habían expulsado el primer corpúsculo polar se consideraron maduros, y este resultado fue expresado en porcentaje. Consecutivamente los ovocitos fueron fotografiados con una cámara acoplada a un microscopio provisto con un software (AmScope V.3.7) calibrado para mediciones microscópicas, cuyas medidas fueron expresadas en micrómetros. Los resultados fueron analizados con el software estadístico SAS. Los Coc´s provenientes de ovarios CCL tuvieron un espesor estadísticamente similar que los de SCL (16,0±0,18 y 15,8±0,22 µm). Asimismo, en las dos categorías de ovarios (CCL y SCL) el diámetro (125,9±0,49 y 126,5±0,57 µm) y el volumen (1´060.254,6±12502,0 y 1´072.845,0±11748,3µm3) fue también similar. Sin embargo, la tasa de maduración fue mayor (P<0,0001) en los ovocitos provenientes de ovarios CCL que en los SCL (62,8 ± 1.3 y 47,3 ± 1.6%). Se concluye que los Coc´s que fueron recuperados de ovarios que tenían un cuerpo lúteo activo o funcional presentaron una mayor tasa de maduración, pero iguales características morfométricas.