Efecto de la proteína de choque térmico HSPA1A en la crioresistencia de espermatozoides caninos congelados y vitrificados
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Date
2025-02-10
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Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
Heat shock proteins (HSP) protect cellular membranes when they are subjected to thermal stress. HSPs could protect canine sperm during conventional freezing (CC) and kinetic vitrification (VIT) processes. This study evaluated the effect of recombinant HSPA1A protein on the cryoresistance and cryosurvival of epididymal sperm from canines (Canis lupus familiaris) subjected to CC and VIT. A total of 40 epididymides from 20 bilaterally orchiectomized dogs were used. Samples from the left testes were frozen using CC, while samples from the right testes were vitrified using VIT. Four treatments (per dog) were established with or without the addition of 10 µg/ml of HSPA1A protein: CC-HSPA1A, CC-control, VIT-HSPA1A, and VIT-control. CC was performed using static nitrogen liquid (NL2) vapors, while VIT was carried out by directly submerging 30 µl drops of sample in NL2. The results showed that the CC treatments provided greater sperm cryoresistance than the VIT treatments (p < 0.05). Samples treated with HSPA1A in both methods showed significant improvements in motility, viability, DNA integrity, and cryoresistance indices compared to the controls. In particular, the CC-HSPA1A treatment showed better acrosomal integrity compared to CC-control (p < 0.05). In conclusion, the addition of HSPA1A protein to cryopreservation media improved sperm cryoresistance by enhancing motility, membrane integrity, and DNA integrity after cryopreservation.
Resumen
Las proteínas de choque térmico (HSP) protegen a las membranas celulares cuando éstas son sometidas a procesos de estrés térmico. Las HSP podrían proteger a los espermatozoides caninos durante los procesos de congelación convencional (CC) y vitrificación cinética (VIT) de espermatozoides caninos. Esta investigación evaluó el efecto de la proteína recombinante HSPA1A sobre la crioresistencia y criosupervivencia de espermatozoides epididimarios de caninos (Canis lupus familiaris) sometidos a CC y VIT. Se utilizaron 40 epidídimos de 20 perros orquiectomizados bilateralmente. Las muestras de los testículos izquierdos se congelaron por CC, y las del lado derecho se vitrificaron por VIT. Se establecieron 4 tratamientos (por perro), con o sin adición de 10 µg/ml de proteína HSPA1A: CC-HSPA1A, CC-control, VIT-HSPA1A y VIT-control. La CC se realizó mediante vapores de Nitrógeno líquido (NL2) estático, mientras que la VIT se llevó a cabo sumergiendo gotas de 30 µl de muestra en NL2. Los resultados demostraron que los tratamientos de CC proporcionaron mayor crioresistencia espermática que los tratamientos de VIT (p < 0,05). Las muestras tratadas con HSPA1A en ambos métodos mostraron mejoras significativas en motilidad, viabilidad, integridad de ADN e índices de crioresistencia, comparadas con los controles. En particular, el tratamiento CC-HSPA1A presentó una mejor integridad acrosomal en comparación con CC-control (p < 0,05). En conclusión, la adición de la proteína HSPA1A a los medios de criopreservación mejoró la crioresistencia de los espermatozoides, aumentando su motilidad, integridad de membranas y ADN tras la criopreservación.
Keywords
Medicina Veterinaria, Espermatozoides, Congelación convencional
Citation
Código de tesis
TV; 550
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario