Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/42386
Título : | Optimización de ensayos de ELISA indirecto y Dot Blot para la detección de anticuerpos anti- Toxoplasma gondii en felinos (Felis catus domesticus) con las proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7 |
Autor: | Montalván Pérez, Samantha Mariela Castro Atariguana, Jairo Orlando |
Director(es): | Vallecillo Maza, Antonio Javier |
ORCID del investigador: | 0000-0001-9141-0176 |
Materia: | CIUC::Ciencias de la Vida::Zoología::Parasitología Animal |
Palabras clave : | Toxoplasmosis Proteínas recombinantes Trastornos digestivos Infecciones |
Fecha de publicación : | 6-jul-2023 |
Paginación: | 68 páginas |
Editor: | Universidad de Cuenca |
Abstract: | Toxoplasmosis is caused by the single-celled parasite Toxoplasma gondii, whose definitive
hosts are domestic cats. This infection tends to show some clinical symptoms. In some cases,
it might produces some digestive, neuronal, and reproductive disorders. T. gondii infection
might be acquired through contaminated water or food containing oocysts, therefore, its
diagnosis is important, since in the cat the parasite reproduces sexually, thus allowing a
greater diversity of genes in T. gondii and in its next generations. Several studies suggest
promising alternatives to identify T gondii antigens in cats using recombinant proteins in tests
like indirect ELISA and Dot Blot, this research reaches to optimize that tests to detect antibodies
anti-T. gondii. In our serologic samples from domestic cats, using recombinant proteins
TgSAG2 and TgSAG7 from T gondii. It obtained great results,the results in indirect ELISA using
as the protocol of the combination of the antigen TgSAG2Multisorp plaque, BSA, and as
substrate ABTS. For the protocol of Dot Blot, the best combination was with the antigen
TgSAG2 membrane PVDF. Substrate DAB and dilution in BSA and blocking with BSA. With
respect to the test there were no significant differences between the test of indirect ELISA, and
Dot Blot, showing that both methods are suitable for the diagnosis of infection by T gondii in a
short period of time and with a minimum amount of money. |
Resumen : | La Toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria causada por Toxoplasma gondii, cuyo
hospedador definitivo es el gato doméstico, por lo general la infección tiene un curso sin
manifestaciones clínicas, aunque en algunos casos puede producir trastornos digestivos,
neuronales y reproductivos. La infección por T. gondii se puede adquirir mediante el consumo
de agua o alimentos contaminados con oocistos eliminados por felinos domésticos a través de
las heces, por ello es importante su diagnóstico, ya que, en el gato el parásito se reproduce
de manera sexual, permitiendo así una mayor diversidad de genes en el T. gondii y en sus
próximas generaciones. Varios estudios sugieren alternativas diagnósticas prometedoras
para identificar anticuerpos anti-T. gondii en gatos con el uso de proteínas recombinantes
en ensayos como ELISA indirecto y Dot Blot, en esta investigación se logró optimizar ambos
ensayos para detectar anticuerpos anti-T. gondii en muestras serológicas de gatos
domésticos, utilizando proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7 de T. gondii. Se
obtuvieron resultados favorables en el ELISA indirecto utilizando como protocolo a la
combinación de antígeno al TgSAG2, placa Multisorp, bloqueo BSA, diluyente leche
descremada y como sustrato ABTS. Para el protocolo de Dot Blot la mejor combinación fue
con el antígeno TgSAG2, membrana PVDF, sustrato DAB, dilución en solución de BSA y
bloqueo con BSA. En cuanto al tipo de ensayo no se observaron diferencias significativas (p
≤ 0,05) entre el ensayo ELISA y Dot Blot, demostrando que ambos son idóneos para
diagnosticar infección por T. gondii en corto tiempo y a costos reducidos. |
URI : | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/42386 |
Código: | TV;443 |
Grado Académico: | Médico Veterinario Zootecnista |
Aparece en las colecciones: | Tesis de Pregrado
|