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Título : Optimización de ensayos de ELISA indirecto y Dot Blot para la detección de anticuerpos anti- Toxoplasma gondii en felinos (Felis catus domesticus) con las proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7
Autor: Montalván Pérez, Samantha Mariela
Castro Atariguana, Jairo Orlando
Director(es): Vallecillo Maza, Antonio Javier
ORCID del investigador: 
0000-0001-9141-0176
Materia: CIUC::Ciencias de la Vida::Zoología::Parasitología Animal
Palabras clave : Toxoplasmosis
Proteínas recombinantes
Trastornos digestivos
Infecciones
Fecha de publicación : 6-jul-2023
Paginación: 68 páginas
Editor: Universidad de Cuenca
Abstract: 
Toxoplasmosis is caused by the single-celled parasite Toxoplasma gondii, whose definitive hosts are domestic cats. This infection tends to show some clinical symptoms. In some cases, it might produces some digestive, neuronal, and reproductive disorders. T. gondii infection might be acquired through contaminated water or food containing oocysts, therefore, its diagnosis is important, since in the cat the parasite reproduces sexually, thus allowing a greater diversity of genes in T. gondii and in its next generations. Several studies suggest promising alternatives to identify T gondii antigens in cats using recombinant proteins in tests like indirect ELISA and Dot Blot, this research reaches to optimize that tests to detect antibodies anti-T. gondii. In our serologic samples from domestic cats, using recombinant proteins TgSAG2 and TgSAG7 from T gondii. It obtained great results,the results in indirect ELISA using as the protocol of the combination of the antigen TgSAG2Multisorp plaque, BSA, and as substrate ABTS. For the protocol of Dot Blot, the best combination was with the antigen TgSAG2 membrane PVDF. Substrate DAB and dilution in BSA and blocking with BSA. With respect to the test there were no significant differences between the test of indirect ELISA, and Dot Blot, showing that both methods are suitable for the diagnosis of infection by T gondii in a short period of time and with a minimum amount of money.
Resumen : 
La Toxoplasmosis es una enfermedad parasitaria causada por Toxoplasma gondii, cuyo hospedador definitivo es el gato doméstico, por lo general la infección tiene un curso sin manifestaciones clínicas, aunque en algunos casos puede producir trastornos digestivos, neuronales y reproductivos. La infección por T. gondii se puede adquirir mediante el consumo de agua o alimentos contaminados con oocistos eliminados por felinos domésticos a través de las heces, por ello es importante su diagnóstico, ya que, en el gato el parásito se reproduce de manera sexual, permitiendo así una mayor diversidad de genes en el T. gondii y en sus próximas generaciones. Varios estudios sugieren alternativas diagnósticas prometedoras para identificar anticuerpos anti-T. gondii en gatos con el uso de proteínas recombinantes en ensayos como ELISA indirecto y Dot Blot, en esta investigación se logró optimizar ambos ensayos para detectar anticuerpos anti-T. gondii en muestras serológicas de gatos domésticos, utilizando proteínas recombinantes TgSAG2 y TgGRA7 de T. gondii. Se obtuvieron resultados favorables en el ELISA indirecto utilizando como protocolo a la combinación de antígeno al TgSAG2, placa Multisorp, bloqueo BSA, diluyente leche descremada y como sustrato ABTS. Para el protocolo de Dot Blot la mejor combinación fue con el antígeno TgSAG2, membrana PVDF, sustrato DAB, dilución en solución de BSA y bloqueo con BSA. En cuanto al tipo de ensayo no se observaron diferencias significativas (p ≤ 0,05) entre el ensayo ELISA y Dot Blot, demostrando que ambos son idóneos para diagnosticar infección por T. gondii en corto tiempo y a costos reducidos.
URI : http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/42386
Código: TV;443
Grado Académico: 
Médico Veterinario Zootecnista
Aparece en las colecciones: Tesis de Pregrado

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