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Title: Detección por medio de la técnica RT-PCR de los virus CymMV y ORSV en el cultivo de orquídeas
Other Titles: Maskana. Revista científica
Authors: Villena Ochoa, Paulina G.
Universidad de Cuenca
DIUC
Dirección de Investigación de la Universidad de Cuenca
Keywords: CYMBIDIUM MOSAIC POTEXVIRUS (CYMMV)
ODONTOGLOSSUM RINGSPOT TOBAMOVIRUS (ORSV)
RT-PCR
ELISA
Issue Date: Jun-2013
metadata.dc.ucuenca.paginacion: pp. 41-51
Publisher: Universidad de Cuenca
metadata.dc.description.city: 
Cuenca
metadata.dc.type: Article
Abstract: 
Cymbidium mosaic potexvirus (CymMV) and Odontoglossum ringspot tobamovirus (ORSV) are the most prevalent pathogens affecting worldwide the cultivation of orchids, causing incalculable losses in revenue. They reduce growth vigor and quality, and what is most problematic they are not curable once infected. A diagnostic method, based on the chain reaction reverse transcription polymerase (RT-PCR), was developed to detect both viruses. The method consists of the extraction of nucleic acids of infected plants and applying the RT-PCT method, similar to the ELISA (enzyme linked immuno-sorbent assay) virus indexing technique. Leave, flower and bulb samples of different species of in vitro reproduced healthy and affected Cattleya orchids were analyzed in the molecular biotechnology laboratory of Concept Blue Corporation in Guayaquil, Ecuador. The comparative analysis revealed that RT-PCR is more effective in the detection of CymMV and ORSV viruses than the ELISA technique. Furthermore the study revealed that CymMV was preferentially detected in leaves, flowers and small bulbs, while the ORSV virus was only detected in leaves and bulbs. The latter permitted to describe the symptoms associated to each type of infection and the propagation of virus-free plants applying the meristem-tip culture.
Description: 
Revista semestral de la DIUC 41 Detección por medio de la técnica RT-PCR de los virus CymMV y ORSV en el cultivo de orquídeas Paulina G. Villena Ochoa Facultad de Ciencias Agropecuarias, Universidad de Cuenca, Cuenca, Ecuador. Autor para correspondencia: paulina.villena@ucuenca.edu.ec Fecha de recepción: 7 de marzo 2013 - Fecha de aceptación: 21 de junio 2013 RESUMEN El Cymbidium mosaic potexvirus (CymMV) y Odontoglossum ringspot tobamovirus (ORSV), constituyen dos de los virus más prevalecientes y económicamente importantes en el cultivo de orquídeas. Ambos virus han ocasionado incalculables pérdidas a los cultivadores, convirtiéndose en patógenos severos que reducen el vigor de la planta, calidad de las flores y lo que es peor no pueden ser controlados por ningún método. El método de diagnóstico basado en la reacción en cadena de la polimerasa con transcripción reversa (RT-PCR) fue aplicado en la presente investigación para la detección de CymMV y ORSV. Se realizó un estudio comparativo mediante la realización de pruebas serológicas (método ELISA) y RT-PCR, con los resultados se pudo certificar plantas libres de virus a través de la selección de meristemos destinados a la micro-propagación y obtención de plantas sanas. Se evaluaron muestras de hojas, flores, bulbos y plántulas reproducidas in vitro de distintas especies de Catleya de plantas saludables o con señales clínicas de infección. Los ensayos se realizaron en Laboratorio de Biotecnología Molecular de la Empresa Concepto Azul SA en Guayaquil, Ecuador. Los resultados obtenidos mostraron que la técnica de RT-PCR aplicada al diagnóstico de ambos virus es más sensible que el ELISA. Por lo cual, la RT-PCR fue más eficiente para detectar infecciones por CymMV y ORSV. El CymMV fue detectado preferencialmente en hojas, flores y en menor grado en bulbos, mientras que el ORSV solo fue detectado en hojas y bulbos, pero no en flores. Esto condujo a describir sintomatologías asociadas con cada tipo de infección.
URI: http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/5392
ISSN: 1390-6143
Appears in Collections:Volumen 4 No. 1 (2013)

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