Efecto de dos protocolos de congelación de espermatozoides epididimarios de cobayo sobre las características espermáticas post-descongelación
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Date
2023-09-27
Journal Title
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Volume Title
Publisher
Universidad de Cuenca
Abstract
The current study evaluated the effect of two freezing protocols in guinea pig epididymal
spermatozoa on post-thaw sperm characteristics. For this purpose, from a total of twenty-two
guinea pigs, forty-two testes were collected from a local slaughterhouse. Spermatozoa were
recovered by retrograde flushing from the epididymal tail using 1 mL of TCG-YH medium
(tris, citric acid, glucose 20% [v/v] egg yolk). Samples were refrigerated for 60 min at 5°C,
loaded into 0.25 mL straws and frozen in TCG-YH and 5% glycerol using two freezing
protocols: 1) Conventional protocol (CC) using double freezing ramps (24 and 10 cm above
the liquid nitrogen level for 3 and 2 min respectively) in a polystyrene box, and 2) Protocol
with programmed cooling rates (CP) using an automatic freezer. Data were analyzed by
analysis of variance using the general linear model and means were compared with the least
squares test. Kinetic parameters decreased drastically after freezing and thawing. Most
kinetic parameters and the percentage of spermatozoa with intact plasma and acrosomal
membrane were higher (P < 0,05) with the CC protocol than with the CP protocol. However,
the percentage of post-thaw sperm DNA fragmentation did not vary between treatments (P >
0,05). In conclusion, freezing guinea pig epididymal sperm samples with the conventional
procedure resulted in better sperm quality than that attained with programmed freezing.
Resumen
En el presente estudio se evaluó el efecto de dos protocolos de congelación de espermatozoides epididimarios de cuyes sobre las características espermáticas postdescongelación. Para ello, de un total de veinte y dos cobayos, fueron recolectados cuarenta y dos testículos de un matadero local. Los espermatozoides se recuperaron mediante flujo retrógrado de la cola del epidídimo, usando 1 mL de medio TCG-YH (tris, ácido cítrico, glucosa, 20% [v/v] yema de huevo). Las muestras fueron refrigeradas durante 60 minutos a 5°C, cargadas en pajuelas de 0,25 ml y congeladas con TCG-YH y 5% de glicerol usando dos protocolos de congelación: 1) Protocolo convencional (CC) usando doble rampas de congelación (24 y 10 cm sobre el nivel de nitrógeno líquido por tres y dos minutos respectivamente) en una caja de poliestireno, y 2) Protocolo con velocidades de enfriamiento programadas (CP) usando un congelador automático. Los datos se analizaron mediante análisis de varianza usando el modelo lineal general y las medias se compararon con la prueba de los mínimos cuadrados. Los parámetros cinéticos disminuyeron
drásticamente luego de la congelación y descongelación. La mayoría de parámetros
cinéticos y el porcentaje de espermatozoides con membrana plasmática y acrosomal intacta
fueron mayores (P < 0,05) con el protocolo CC que con el protocolo CP. Sin embargo, el
porcentaje de fragmentación del ADN espermático post-descongelación no varió entre
tratamientos (P > 0,05). En conclusión, la congelación de muestras espermáticas
epididimarias de cobayo con el procedimiento convencional resultó en mejor calidad
espermática que la obtenida con la congelación programada.
Keywords
Veterinaria, Conservación biológica, Aparato reproductor, Reproducción animal
Citation
Código de tesis
TV;458
Código de tesis
Grado Académico
Médico Veterinario Zootecnista