| Title: | Evaluación de la eficiencia de un ensayo LAMP para la identificación de material genético de Toxoplasma gondii en leche bovina |
| Authors: | Aguilar Criollo, Juan Francisco
Belesaca Suqui, Pablo Ricardo |
| metadata.dc.contributor.advisor: | Palacios Ordóñez, Teófilo Estuardo |
| metadata.dc.ucuenca.correspondencia: | juxnfrxn@gmail.com
ricardobelesak@gmail.com |
| metadata.dc.subject.other: | Parasitología |
| Keywords: | Medicina Veterinaria
Salud pública
Leche
Zoonosis |
| metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoamplio: | 24 Ciencias de la Vida |
| metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescodetallado: | 2401.12 Parasitología Animal |
| metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoespecifico: | 3109 Ciencias Veterinarias |
| Issue Date: | 1-Aug-2022 |
| metadata.dc.format.extent: | 44 páginas |
| Publisher: | Universidad de Cuenca |
| metadata.dc.description.city: | Cuenca |
| Series/Report no.: | TV;404 |
| metadata.dc.type: | bachelorThesis |
| Abstract: | Toxoplasma gondii is a zoonotic protozoan parasite, considered of great importance
since it is considered a public health problem and it affects a vulnerable population due
to the need to implement a safe and reliable diagnostic method.
Currently, the LAMP assay has proven to be a cost-effective diagnostic test for infectious
microorganisms. The objective of this study was to evaluate the efficiency of the LAMP
molecular technique for the identification of genetic material of Toxoplasma gondii in milk
from cows whose productive destination is the production of quesillo or cheese in an
artisanal way. 100 milk samples from 100 cows were obtained, subsequently aliquots of
each sample were made for storage at -80 °C and purified DNA extraction following the
Ghaheri method for purification.
The purified DNA was made a process control to ensure that the samples obtained are
correct, this by means of a LAMP assay which is carried out using a primer kit for the
amplification of Bos Taurus DNA, where an agar gel was subsequently made to amplify
it with electrophoresis and culminating with the photodocumentator to observe the
results.
Then, a LAMP assay was performed to verify the presence or not of Toxoplasma gondii
genetic material following exactly the same steps that were used in the LAMP assay for
process control with the difference that a different primer kit was used so that the DNA
of T. gondii can be amplified.
The result of the process control was favorable, 100% of the samples obtained were
positive, which confirms that the samples were extracted, transported and stored
correctly. On the other hand, the LAMP assay for amplification of genetic material of T.
gondii was negative in all samples.
This study concluding that the LAMP assay to amplify genetic material of Toxoplasma
gondii did not have positive results, this may be due to several factors such as: the
climatic conditions of the place, the presence of vectors, and the survival of the parasite
in the organism of the cows. Etc. Therefore, this method cannot be definitively ruled out
for the diagnosis of T. gondii. |
| Description: | El Toxoplasma gondii es un parásito protozoario zoonótico, considerado de gran
importancia ya que es contemplado como un problema de salud pública y que afecta a
población vulnerable por eso es necesario la implementación de un método diagnostico
que sea seguro y confiable.
En la actualidad el ensayo LAMP ha demostrado ser una prueba diagnóstica rentable
para distintos microrganismos de carácter infeccioso. El objetivo de este estudio fue
evaluar la eficiencia de la técnica molecular LAMP para la identificación de material
genético de Toxoplasma gondii en leche de vacas cuyo destino productivo sea la
elaboración de quesillo o queso de forma artesanal. Se obtuvo 100 muestras de leche
provenientes de 100 vacas, posteriormente se elaboró alícuotas de cada muestra para
su almacenamiento a -80 °C y extracción del ADN purificados siguiendo el método de
Ghaheri para la purificación del mismo.
En el ADN purificado se realizó un control de proceso para asegurar que las muestras
obtenidas sean correctas esto mediante un ensayo LAMP el cual se realiza utilizando
un set de primers para la amplificación de ADN de B. Taurus, se realizó una
electroforesis en gel de agarosa y posteriormente se fotodocumentó el resultado.
Luego se realizó un ensayo LAMP para verificar la presencia o no de material genético
de Toxoplasma gondii siguiendo exactamente los mismos pasos que se utilizó en el
ensayo LAMP para el control de proceso con la diferencia que se utilizó un set de primers
específicos para amplificación de material genético de T. gondii.
El resultado del control de proceso fue favorable, el 100% de las muestras obtenidas
fueron positivas lo que confirma que las muestras se extrajeron, transportaron y
almacenaron correctamente. Por otro lado el ensayo LAMP para amplificación de
material genético de T. gondii fue negativo en todas las muestras.
Este estudio concluye que el ensayo LAMP para amplificar material genético de
Toxoplasma gondii no tuvo resultados positivos esto puede deberse a varios factores
como: las condiciones climáticas del lugar, presencia de vectores, la sobrevivencia del
parásito en el organismo de las vacas, Etc. Por lo tanto no se puede descartar
definitivamente este método para el diagnóstico de T. gondii. |
| metadata.dc.description.degree: | Médico Veterinario Zootecnista |
| URI: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/39561 |
| Appears in Collections: | Tesis de Pregrado
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