Title: | Implementación de un protocolo de maduración in vitro de ovocitos de cobaya (Cavia porcellus) |
Authors: | Zhinin Criollo, Andrea Belén Buñay Ortiz, Pedro Alexis |
metadata.dc.contributor.advisor: | Ayala Guanga, Luis Eduardo |
metadata.dc.ucuenca.correspondencia: | www.zhininandrea@hotmail.com alexpb087@gmail.com |
metadata.dc.subject.other: | Embriología |
Keywords: | Medicina Veterinaria Ovocitos Maduración Morfología animal |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoamplio: | 24 Ciencias de la Vida |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescodetallado: | 3109.02 Genética |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoespecifico: | 3109 Ciencias Veterinarias |
Issue Date: | 17-Jun-2022 |
metadata.dc.format.extent: | 66 páginas |
Publisher: | Universidad de Cuenca |
metadata.dc.description.city: | Cuenca |
Series/Report no.: | TV;400 |
metadata.dc.type: | bachelorThesis |
Abstract: | One of the strategies used worldwide for the multiplication and conservation of
material of high genetic value or in danger of extinction is the production of in vitro
embryos. The objective was to evaluate an in vitro maturation protocol for
cumulus-oocyte complexes (COC´s) from guinea pigs (Cavia porcellus). 760
COC´s corresponding to 52 ovaries were obtained using the Slicing technique.
The COCs were selected according to the methodology described by Hawk and
Wall (1994) and modified by Ayala et al. (2019) for bovine COC´s (type A; B; C).
Once the COC´s of each type were obtained, 20% was used for pre-maturation
morphometry, another 20% was used as a control and went directly to the in vitro
maturation process (IVM) for 24 h. The remaining 60% was applied the Brilliant
Cresyl Blue (BCB) test and growth (BCB+) and those that were still growing
(BCB-) were determined, then each type and its subgroups (BCB+ and BCB-)
were matured. in vitro for 24 hours. Finally, the percentage of maturation and
post-maturation morphometry were established. The recovered oocytes were
morphologically classified as 35.8% type A COC´s, 30.9% B and 33.3% type C.
It was determined that 71.6%, 60%, 63.5% of COC´s type A, B and C respectively
reacted to the BCB test. When performing the morphometry, it was established
that the COC´s of Type A and B (suitable) were larger than the unsuitable COC´s
(type C), with a statistical difference. The COC´s of the control group of type A,
matured in 40.4%, types B 31.7% and type C 18.2%. However, the percentage
of nuclear maturation was affected when COC´s of types A; B and C, were
subjected to the BCB test and subsequently matured for 24 hours. In conclusion:
the maturation medium used allowed the oocytes to reach metaphase II;
however, these percentages are much lower than expected. |
Description: | Una de las estrategias que se utilizan a nivel mundial para la multiplicación y
conservación del material de alto valor genético o en peligro de extinción es la
producción de embriones in vitro. El objetivo fue evaluar un protocolo de
maduración in vitro de complejos cúmulo-ovocitos (COC’s) de cobayas (Cavia
porcellus). Se obtuvieron 760 COC’s correspondientes a 52 ovarios, mediante la
técnica de Slicing. Los COC´s fueron seleccionados de acuerdo a la metodología
descrita por Hawk y Wall (1994) y modificada por Ayala et al. (2019) para COC´s
de bovinos (tipo A; B; C). Una vez obtenidos los COC´s de cada tipo, el 20% fue
utilizado para morfometría pre-maduración, otro 20% se utilizó como testigo y
paso directamente al proceso de maduración in vitro (MIV) por 24 h. El restante
60% se aplicó la prueba del Azul Brillante de Cresilo (BCB) y se determinó el
crecimiento (BCB+) y aquellos que aún estaban en crecimiento (BCB-), luego
cada tipo y sus subgrupos (BCB+ y BCB-) fueron madurados in vitro durante 24
h. Finalmente se estableció el porcentaje de maduración y morfometría postmaduración. Los ovocitos recuperados fueron clasificados morfológicamente en
un 35,8% de COC’s de tipo A, un 30,9% B y el 33,3% de tipo C. Se determinó
que el 71,6%, 60%, 63,5% de COC´s tipo A, B y C respectivamente reaccionaron
a la prueba BCB. Al realizar la morfometría se estableció que los COC´s de Tipo
A y B (aptos), fueron más grandes que los COC´s no aptos (tipo C), con
diferencia estadística. Los COC´s del grupo testigo de tipo A, maduraron en un
40,4%, los tipos B 31,7% y tipo C un 18,2%. Sin embargo, el porcentaje de
maduración nuclear se vio afectado cuando los COC´s de los tipos A; B y C,
fueron sometidos a la prueba del BCB y posteriormente colocados a madurar por
24 horas. En conclusión: el medio de maduración usado permitió que los ovocitos
llegaran a metafase II; sin embargo, estos porcentajes están muy por debajo de
lo esperado. |
metadata.dc.description.degree: | Médico Veterinario Zootecnista |
URI: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/39214 |
Appears in Collections: | Tesis de Pregrado
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