| Resumen : | Candida parapsilosis es un complejo formado por tres especies: Candida parapsilosis sensu stricto, C. orthopsilosis y C. metapsilosis, debido a su heterogeneidad genética, pero que fenotípicamente son indistinguibles1. Actualmente, es la segunda levadura más aislada en infecciones del torrente sanguíneo1,2 y en sitios de cavidad bucal3, siendo sensu stricto y metapsilosis, las especies mayormente recuperadas de nichos bucales tanto en pacientes sanos3 como inmunocomprometidos4. Se ha reportado disparidad en la susceptibilidad antifúngica entre las especies de este complejo5,6,7,8; no existiendo datos en Argentina sobre su distribución y comportamiento en cavidad bucal. Objetivo: Caracterizar por métodos moleculares una colección de aislamientos Argentinos previamente identificados como C. parapsilosis, de diferentes nichos bucales, en una cohorte de pacientes con distintas situaciones clínicas. Materiales y Métodos: El estudio experimental se realiza en 41 aislamientos clínicos del complejo C. parapsilosis obtenidos de pacientes ambulatorios, hospitalizados y de diferentes nichos de cavidad bucal, recolectados en estudios de investigación previos. Para la tipificación molecular se recuperaron los aislamientos guardados e identificados previamente como C. parapsilosis en medios cromogénico diferencial para Candida, Sabouraud y posteriormente en caldo YPD (extracto de levadura, peptona y carne). Se empleó la técnica de ruptura de pared con zymolasa y el protocolo de la Quiagen (Quiam blodd DNA kit) para la extracción de ADN. La caracterización molecular se efectúa con PCR de punto final, empleando cebadores específicos (CPAR, CPAF, COOR, COOF, CMEF, CMER) derivados de secuencias únicas contenidas en el espaciador transcripcional interno 1 (ITS 1)-5.8rRNA-ITS2 del ADN ribosomal fúngico. Los datos serán validados mediante secuenciación por Sanger. La sensibilidad in vitro de los aislamientos frente a azoles, equinocandinas, anfotericina B y flucytosina es evaluada con CIM (Concentración inhibitoria mínima), bajo las normas CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) mediante método automatizado Vitek2 (Biomerieux). Los datos son procesados en el programa Excel; empleando STADISTICX 7.0 y SPSS versión 11.0 para el análisis. La significancia estadística es estimada con prueba Chi cuadrado, empleando un nivel de confianza del 95%. Resultados preliminares: De los 41 aislamientos caracterizados, 31 (75.6%) son positivos para la especie sensu stricto (Fig.1), de los cuales 22 (70.9%) provienen de mucosa bucal, y 9 (29.0%) de surco gingival. El 77.4% (24/31) de los aislamientos positivos para sensu stricto se recuperaron en condiciones bucales inflamatorias (X2 p=0.0048) y el 54.8% (17/31) provienen de pacientes con diversas formas de aparatología intraoral. Hasta el momento se ha evaluado la sensibilidad antifúngica (Tabla 1) en 19 de las 31 cepas caracterizadas como C. parapsilosis sensu stricto, de las cuales 18 (94.7%) fueron sensibles a los 6 antimicóticos testeados (fluconazol, voriconazol, caspofungina, micafungina, anfotericina B y flucytosina). Solo 1 (5.2%) cepa sensu stricto resultó resistente tanto a fluconazol (MIC: 4 mg/L) como a caspofungina (MIC: >=4mg/L), y mostrando una sensibilidad intermedia a voriconazol (MIC:<=0.25 mg/L). Estos resultados concuerdan con los de Miranda, et al9. 2011; Treviño Rangel et al1. 2011; y García, et al10. 2012; quienes informaron resistencia y/o susceptibilidad reducida a fluconazol, voriconazol y caspofungina para la especie sensu stricto. Dos trabajos (Silva et al11. 2009 y Canton et al5. 2011) han informado resistencia de la especie sensu stricto a anfotericina B, lo cual se contrapone con nuestros resultados. No encontramos ningún estudio que haya evaluado la susceptibilidad in vitro de C. parapsilosis a flucytosina. Conclusiones: C. parapsilosis sensu stricto es un colonizante habitual de mucosa oral bajo condiciones patológicas, y muestra una respuesta favorable a un amplio grupo de antifúngicos, sin embargo sigue existiendo disparidad en los resultados de sensibilidad antifúngica entre los diferentes trabajos y zonas geográficas. |
