Effect of fetal calf serum on production and crytolerance of in vitro bovine embryos from ecuadorian creole heifers

Abstract

In the Ecuadorian Andes there is a Creole bovine biotype whose population is disappearing. In vitro embryo production and cryopreservation is an important biotechnology that allows the conservation of animals threatened with extinction. The objective of this study was to determine the in vitro production and cryopreservation of embryos from creole heifers raised in the highlands of Ecuador. Immature cumulus-oocyte complexes (COC´s) were retrieved by ovum pickup from 10 Creole heifers (OPU) and from abattoir ovaries (control). The experiment was completed within 8 replicates. COC´s were cultured in a maturation medium following IVF and in vitro culture. After denudation (Day 1 after IVF), presumptive embryos from each oocyte source were split into 2 groups: with (FCS+) and without (FCS-) FCS (2,5%), which was added on day 5 after IVF. On day 7, embryos were evaluated, and those with quality I were vitrified. After warming embryo re-expansion at 2h and embryo re-expansion and hatching at 24 and 48h were evaluated. Regardless of the oocyte source, the addition of 2,5% FCS decreased embryo re-expansion at 2h and reduced embryo hatching at 48h in the OPU group. In conclusion, FCS did not improve embryo production and adversely affected the cryotolerance of embryos produced in vitro from Ecuadorian creole heifers.

Resumen

En los Andes ecuatorianos hay un biotipo bovino criollo cuya población está desapareciendo. La producción in vitro de embriones y la crioconservación es una biotecnología importante que permite la conservación de animales en peligro de extinción. El objetivo de este estudio fue determinar la producción in vitro y la crioconservación de embriones de novillas criollas criadas en las tierras altas de Ecuador. Los complejos de ovocitos y cúmulos inmaduros (COC) se recuperaron mediante recolección de óvulos de 10 novillas criollas (OPU) y de ovarios de matadero (control). El experimento se completó en 8 repeticiones. Los COC se cultivaron en un medio de maduración después de la FIV y el cultivo in vitro. Después de la denudación (día 1 después de la FIV), los supuestos embriones de cada fuente de ovocitos se dividieron en 2 grupos: con (FCS +) y sin (FCS-) FCS (2,5%), que se añadió el día 5 después de la FIV. En el día 7, se evaluaron los embriones y se vitrificaron los de calidad I. Después de calentar la reexpansión del embrión a las 2 h, se evaluó la reexpansión del embrión y la eclosión a las 24 y 48 h. Independientemente de la fuente de ovocitos, la adición de un 2,5% de FCS redujo la reexpansión del embrión a las 2 h y redujo la eclosión de los embriones a las 48 h en el grupo OPU. En conclusión, el FCS no mejoró la producción de embriones y afectó adversamente la criotolerancia de los embriones producidos in vitro a partir de novillas criollas ecuatorianas.

Keywords

Embryos, In-Vitro, Cryotolerance, Creole, Heifers

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