Logo Repositorio Institucional

Please use this identifier to cite or link to this item: http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/30853
Title: Optimización experimental de un método cromatográfico HPLC-DAD para el análisis de polifenoles en frutas
Authors: Saquicela Carpio, Jorge Eduardo
metadata.dc.contributor.advisor: Ortiz Ulloa, Silvia Johana
metadata.dc.ucuenca.correspondencia: jorge.saqui@gmail.com
Keywords: Bioquimica
Polifenoles
Frutas
Diseño Factorial
Extraccion
Mango
Cromatografia
Issue Date: 16-Jul-2018
metadata.dc.ucuenca.embargoend: 16-Jul-2020
metadata.dc.ucuenca.paginacion: 94 páginas
metadata.dc.description.city: 
Cuenca
Series/Report no.: TBQ;724
metadata.dc.type: bachelorThesis
Abstract: 
The aim of the present study was to develop and optimize a HPLC-DAD method for the analysis of polyphenols in fruits. For the experiments, standards of nine phenolic compounds were used, initial runs were performed with conditions based on scientific papers. Method optimization was carried out by using a factorial design, followed by a central composite design and a desirability test to determine the influence of the variables flow rate, column temperature and acidification of the mobile phase on the response variable efficiency. Through the optimization tests, the optimal chromatographic conditions proposed by the models were determined. Next, the optimized analytical method was applied on lyophilized mango samples extracted by a method developed utilizing literature review. In the factorial design, a low adjustment of the model was observed and the variable acidification of the mobile phase was not significant. There was an adjustment improvement with the composite central design. A heterogeneous influence of the variables analyzed on the chromatographic efficiency was demonstrated. The desirability test proposed the optimal conditions of 0.64 mL / min for the flow rate and 29.1°C for the column temperature, this proposal was of little applicability for practical reasons. At last, a final method of 43.5 min was obtained at the optimal wavelengths of 254, 280 and 320 nm. Chromatograms with resolved peaks were obtained for mango samples with an acceptable variation (4.4 - 7.6% CV), denoting the applicability of the optimized method and the utility of the extraction method. In the samples, 4 out of 9 phenolic compounds analyzed were identified and quantified. On the other hand, the need for corroboration of analytical recovery and application of the method in other matrices was observed.
Description: 
El objetivo del presente estudio fue desarrollar y optimizar un método de HPLC-DAD para el análisis de polifenoles en frutas. Para los experimentos se utilizaron estándares de nueve compuestos fenólicos, se realizaron pruebas iniciales aplicando condiciones obtenidas de publicaciones científicas. La optimización del método se llevó a cabo mediante el uso de un diseño factorial, seguido de un diseño central compuesto y de un test de deseabilidad para determinar la influencia de las variables velocidad de flujo, temperatura de columna y acidificación de la fase móvil en la variable respuesta eficiencia. A través de las pruebas de optimización, se determinaron las condiciones cromatográficas óptimas propuestas por los modelos. Posteriormente, se aplicó el método analítico optimizado en muestras de mango liofilizadas extraídas por un método desarrollado previa revisión bibliográfica. En el diseño factorial, se observó un bajo ajuste del modelo siendo la variable acidificación de fase móvil no significativa. Existió una mejora de ajuste con el diseño central compuesto. Se demostró una influencia heterogénea de las variables analizadas sobre la eficiencia cromatográfica. La prueba de deseabilidad propuso las condiciones óptimas de 0.64 mL/min para el flujo y 29.1°C para la temperatura de columna, esta propuesta fue de poca aplicabilidad por razones prácticas. Finalmente, se obtuvo un método de 43.5 min a las longitudes de onda óptimas de 254, 280 y 320 nm. Se obtuvieron cromatogramas con picos resueltos para las muestras de mango con una variación aceptable (4.4 - 7.6 %CV), denotando la aplicabilidad del método optimizado y la utilidad del método de extracción. En las muestras se logró identificar y cuantificar 4 de 9 compuestos fenólicos analizados. Por otro lado, se observó la necesidad de corroboración de recuperación y de aplicación del método en otras matrices.
metadata.dc.description.degree: 
Bioquímico Farmacéutico
URI: http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/30853
Appears in Collections:Tesis de Pregrado

Files in This Item:
File Description SizeFormat 
TRABAJO DE TITULACIÓN.pdftexto completo2.34 MBAdobe PDFThumbnail
View/Open


This item is protected by original copyright



Items in DSpace are protected by copyright, with all rights reserved, unless otherwise indicated.

 

Centro de Documentacion Regional "Juan Bautista Vázquez"

Biblioteca Campus Central Biblioteca Campus Salud Biblioteca Campus Yanuncay
Av. 12 de Abril y Calle Agustín Cueva, Telf: 4051000 Ext. 1311, 1312, 1313, 1314. Horario de atención: Lunes-Viernes: 07H00-21H00. Sábados: 08H00-12H00 Av. El Paraíso 3-52, detrás del Hospital Regional "Vicente Corral Moscoso", Telf: 4051000 Ext. 3144. Horario de atención: Lunes-Viernes: 07H00-19H00 Av. 12 de Octubre y Diego de Tapia, antiguo Colegio Orientalista, Telf: 4051000 Ext. 3535 2810706 Ext. 116. Horario de atención: Lunes-Viernes: 07H30-19H00