Efecto de la presión de vacío sobre las características morfológicas de ovocitos bovinos obtenidos de ovarios de matadero
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Date
2018
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Publisher
Asociación Latinoamericana de Producción Animal
Abstract
El efecto adverso de la presión de vacío sobre la competencia de
los ovocitos recuperados mediante ovum pick up (OPU), y de los
embriones obtenidos de estos, ha sido documentado previamente,
pero poco se sabe sobre su efecto en las características
morfológicas de los ovocitos. Se estableció como obejtivo del
estudio evaluar el efecto de la presión de vacío sobre las
características morfométricas de ovocitos bovinos recuperados de
ovarios de matadero. El estudio se realizó en el Laboratorio de
Biotecnología de la Reproducción Animal de la Universidad de
Cuenca, Ecuador. Los ovarios recolectados (n=252) de un
matadero local fueron divididos al azar de manera homogénea en
tres grupos con diferente presión de aspiración folicular: 50, 65 y
80mmHg. Se aspiraron los folículos entre 2-8 mm de diámetro;
para la punción se utilizó una aguja 18Gx1.5 pulgadas conectada a
una bomba de vacío. Se recuperaron y seleccionaron los mejores
COC´s (complejos cúmulos ovocito) de cada grupo: 50 (n=283), 65
(n=263) y 80 mmHg (n=226). Un 30% de cada grupo fueron
colocados en un medio con hialuronidasa al 0,1% (p/v) y
denudados por pipeteo sucesivo. Los ovocitos se fotografiaron con
una cámara montada sobre un microscopio provisto con un
software (AmScope V.3.7) calibrado para realizar mediciones
microscópicas. El otro 70% de COC´s fueron incubados por 24hs
en medio de maduración a base de TCM199, suero fetal bovino,
FSH-p, estradiol, piruvato de sodio, L-glutamina y gentamicina en
una estufa con 5% de CO2, 38.5°C y 90%rh. Luego de madurados,
los COC´s fueron denudados y medidos como se indicó
anteriormente. Los datos se analizaron con el programa estadístico
SAS. Los ovocitos aspirados con 50mmHg antes de la maduración tuvieron un diámetro (sin zona pelúcida) y un volumen (125.8±0.5
µm y 1052327.9±11792.9 µm3) mayor que los obtenidos con 65
(123.3±0.5 µm y 990510.6±12603.9 µm3) o 80 mmHg (122.2±0.5
µm y 992296.4 ± 13652.9 µm3) (P<0,001). Luego de ser
madurados, los ovocitos obtenidos con 50 mmHg tuvieron un
diámetro y un volumen (121.9±0.6 µm y 954686.4±14072.2 µm3)
mayor que los recuperados con 65 (120.1±0.6 µm y
913819.1±14879.8 µm3) (P<0,05), pero fueron similares a los
obtenidos con 80 mmHg (121.4±0.7 µm y 945211.9±16359 µm3).
Como conclusión, a mayor presión de vacío los ovocitos tendieron
a ser más pequeños, es decir, tuvieron menor diametro y volumen.
Asimismo, independientemente de la presión de aspiración, los
ovocitos redujeron su diámetro y volumen como consecuancia de
la maduración.
Resumen
Keywords
Presion De Vacio, Ovocitos, Morfometria, Bovinos