Galarza Lucero, Diego AndrésTorres Elizalde, Ibeth Teresa2025-08-272025-08-272025-08-25https://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/47169El tigrillo (Leopardus tigrinus), es una especie neotropical que se encuentra clasificada como vulnerable según la lista roja de especies amenazadas de la Unión Internacional para la Conservación de la Naturaleza (UICN) debido a la fragmentación de hábitat y deforestación, lo cual supone un riesgo para la supervivencia de esta especie. En este sentido, se consideró como estrategia de conservación el estudio de la caracterización morfométrica de los espermatozoides epididimarios del Leopardus tigrinus. Las muestras fueron obtenidas post-mortem bajo convenio con el Zoo-refugio Yurak Allpa, estos testículos fueron receptados en el laboratorio de biotecnología reproductiva de la Universidad de Cuenca. En donde se utilizó el flujo retrógrado para la extracción del esperma con diluyente TCG-YH (Tris-ácido cítrico-glucosa-yema de huevo al 6 %), los espermatozoides fueron recuperados para posteriormente ser teñidos con SpermBlue®. Para el análisis cuantitativo se empleó el sistema CASA (SCA-Evolution® 2018) con módulo ASMA, evaluando 1823 células en 23 placas teñidas con esperma (≥100 células/muestra). Se identificaron dos subpoblaciones espermáticas basadas en el área cefálica: SP1 (11 - 13,49 µm², n = 950) y SP2 (13,5 - 17 µm², n = 873). La SP2 exhibió dimensiones significativamente mayores (p < 0.05) en todas las variables: área, perímetro, longitud/anchura cefálica, rugosidad, regularidad, porcentaje acrosomal y parámetros de la pieza intermedia. Generalmente, el 77,6 % de los espermatozoides presentaron morfología íntegra, superando registros previos en la especie (59,2 %). Los datos revelan heterogeneidad espermática estructuralmente definida, comparable a patrones observados en otros mamíferos. Estos resultados proporcionan parámetros basales inéditos para criobancos de germoplasma, fundamentales para programas de reproducción asistida destinados a conservar este félido.The tigrillo (Leopardus tigrinus) is a Neotropical species listed as vulnerable on the IUCN Red List due to habitat loss from fragmentation and deforestation, threatening its survival. Therefore, in this study, we propose studying the morphometric features of its epididymal sperm as a conservation strategy. Samples were obtained post-mortem under an agreement with Yurak Allpa Zoo-Refuge and sent to the University of Cuenca's reproductive biotechnology lab. The sperm extraction was performed using retrograde flow with TCG-YH diluent (Tris-citric acid-glucose-egg yolk 6 %), followed by staining with SpermBlue®. Quantitative analysis employed the CASA system (SCA-Evolution® 2018) with the ASMA module, analyzing 1,823 cells across 23 stained plates (at least 100 cells per sample). Two sperm subpopulations were identified based on head size: SP1 (11–13.49 µm², n = 950) and SP2 (13.5–17 µm², n = 873). SP2 had significantly larger dimensions (p<0.05) in all measured variables, including area, perimeter, head length/width, rugosity, regularity, acrosomal percentage, and midpiece features. Overall, 77.6 % of sperm showed intact morphology, exceeding previous records of 59.2 %. Data indicate clear sperm heterogeneity, similar to patterns seen in other mammals. These findings establish baseline parameters for germplasm cryobanks, which are vital for assisted reproduction efforts to conserve this felid.application/pdf47 páginasspahttps://creativecommons.org/licenses/by-nd/4.0Medicina VeterinariaLeopardoFelinosVeterinaria::Medicina VeterinariabachelorThesisopenAccess