Title: | Cryopreservation of dog epididymal spermatozoa by conventional freezing or ultra-rapid freezing with nonpermeable cryoprotectant |
Other Titles: | Criopreservación de espermatozoides del epidídimo canino mediante congelación convencional o congelación ultrarrápida con crioprotector no permeable |
Authors: | Samaniego Campoverde, Jorge Xavier Castaño, Cristina Sánchez Calabuig, María Jesús Taboada Pico, Juan Wualverto Soria Parra, Manuel Elias Landi Loja, Blanca Gabriela Mendez Alvarez, Maria Silvana Mejia Jara, Edisson Leonardo Santiago Moreno, Julián Galarza Lucero, Diego Andres |
metadata.dc.ucuenca.correspondencia: | Galarza Lucero, Diego Andres, andres.galarza@ucuenca.edu.ec |
Keywords: | Ultra-rapid freezing Epididymis Slow freezing Cryopreservation Dog sperm |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientofrascatiamplio: | 4. Ciencias Agrícolas |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientofrascatidetallado: | 4.3.1 Ciencias veterinarias |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientofrascatiespecifico: | 4.3 Medicina Veterinaria |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoamplio: | 08 - Agricultura, Silvicultura, Pesca y Veterinaria |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescodetallado: | 0841 - Veterinaria |
metadata.dc.ucuenca.areaconocimientounescoespecifico: | 084 - Veterinaria |
Issue Date: | 2021 |
metadata.dc.ucuenca.volumen: | Volumen 103 |
metadata.dc.source: | Cryobiology |
metadata.dc.identifier.doi: | 10.1016/j.cryobiol.2021.10.002 |
metadata.dc.type: | ARTÍCULO |
Abstract: | This study was aimed to assess the effectiveness of two methods for cryopreservation of dog epididymal spermatozoa, one by conventional freezing (CF) with shortening both equilibration and cooling times, and the other by ultra-rapid freezing (URF) with nonpermeable cryoprotectant. Sixty epididymides were recovered from thirty orchiectomized adult dogs and the sperm samples were retrieved by retrograde flushing using TCG-EY (tris, citric acid, glucose + 20% egg yolk) extender and then 20 pools were conformed. Each pool was divided into 2 aliquots and then cryopreserved by CF and URF methods respectively. The CF method maintained the cooled-pool samples for 2h (1h without and 1h with 5% glycerol) and then were frozen by liquid nitrogen (LN2) vapors for 2 min. The URF method cryopreserved the cooled-pool samples using TCG-EY+250 mM sucrose, equilibrating during 30 min (5 ◦C) and submerging 30-μL drops directly in LN2. The results showed that the URF method produced a lower percentage of total and progressive motilities and acrosome integrity (P < 0.05) than the CF method. However, the kinetic variables (curvilinear and straight-line velocities, straightness, linearity, wobble, amplitude of lateral head displacement, and beat-cross frequency) and plasma membrane integrity did not differ (P > 0.05) between both cryopreservation methods. Unlike the URF method, the width, area and perimeter of sperm head were reduced after the CF method (P < 0.05). In conclusion, despite the low motility achieved after the ultra-rapid freezing method, the similar values of kinetic, viability and head morphometric dimensions to those obtained after conventional freezing, suggest that ultra-rapid freezing with sucrose may be a useful alternative for the cryopreservation of canine epididymal sperm. |
Description: | Este estudio tuvo como objetivo evaluar la efectividad de dos métodos para la criopreservación de espermatozoides del epidídimo canino, uno por congelación convencional (CF) con reducción de los tiempos de equilibrio y enfriamiento, y el otro por congelación ultrarrápida (URF) con crioprotector no permeable. Se recuperaron sesenta epidídimos de treinta perros adultos orquiectomizados y las muestras de esperma se recuperaron mediante lavado retrógrado usando extensor TCG-EY (tris, ácido cítrico, glucosa + 20% de yema de huevo) y luego se conformaron 20 grupos. Cada grupo se dividió en 2 alícuotas y luego se criopreservó mediante métodos CF y URF respectivamente. El método CF mantuvo las muestras de la piscina enfriada durante 2 h (1h sin y 1h con glicerol al 5%) y luego se congelaron con vapores de nitrógeno líquido (LN2) durante 2 min. El método URF criopreservó las muestras del pool refrigerado utilizando TCG-EY + sacarosa 250 mM, equilibrándolas durante 30 min (5 ◦C) y sumergiendo gotas de 30 μL directamente en LN2. Los resultados mostraron que el método URF produjo un menor porcentaje de motilidades totales y progresivas y la integridad del acrosoma (P <0.05) que el método CF. Sin embargo, las variables cinéticas (velocidades curvilíneas y en línea recta, rectitud, linealidad, oscilación, amplitud del desplazamiento lateral de la cabeza y frecuencia de latido cruzado) y la integridad de la membrana plasmática no difirieron (P> 0,05) entre ambos métodos de criopreservación. A diferencia del método URF, el ancho, el área y el perímetro de la cabeza del esperma se redujeron después del método CF (P <0.05). En conclusión, a pesar de la baja motilidad lograda tras el método de congelación ultrarrápida, los valores de cinética, viabilidad y dimensiones morfométricas de la cabeza similares a los obtenidos tras la congelación convencional, sugieren que la congelación ultrarrápida con sacarosa puede ser una alternativa útil para la criopreservación. de esperma epididimario canino. |
URI: | http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/37752 https://doi.org/10.1016/j.cryobiol.2021.10.002 |
metadata.dc.ucuenca.urifuente: | https://www.journals.elsevier.com/cryobiology |
ISSN: | 0011-2240 |
Appears in Collections: | Artículos
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