Por favor, use este identificador para citar o enlazar este ítem:
http://dspace.ucuenca.edu.ec/handle/123456789/33247
| Título : | Influence of sperm filtration and the addition of glycerol to UHT skimmed milk- and TEST-based extenders on the quality and fertilizing capacity of chilled ram sperm |
| Autor: | Galarza Lucero, Diego Andres
Ladron de guevara, Magdalena
Beltran Breña, Paula
Sánchez Calabuig, María Jesús
Rizos, Dimitrios
Lopez Sebastian, Antonio
Santiago Moreno, Julián |
| Correspondencia: | Sánchez Calabuig, María Jesús, msanch26@ucm.es |
| Palabras clave : | Skim milk
TEST
Cold-stored
Sperm
Filtration |
| Área de conocimiento FRASCATI amplio: | 4. Ciencias Agrícolas |
| Área de conocimiento FRASCATI específico: | 4.3 Medicina Veterinaria |
| Área de conocimiento UNESCO amplio: | 08 - Agricultura, Silvicultura, Pesca y Veterinaria |
| ÁArea de conocimiento UNESCO detallado: | 0841 - Veterinaria |
| Área de conocimiento UNESCO específico: | 084 - Veterinaria |
| Fecha de publicación : | 2019 |
| Fecha de fin de embargo: | 2-ago-2050 |
| Volumen: | volumen 133, número 0 |
| Fuente: | Theriogenology |
| metadata.dc.identifier.doi: | 10.1016 / j.theriogenology.2019.04.027 |
| Tipo: | ARTÍCULO |
| Abstract: | The poor fertility of ram semen stored chilled for long periods has encouraged the development of protocols designed to improve the kinetic vigour and cervical barrier-crossing capacity of sperm. The present work evaluated the effect of sperm selection with Sephadex filtration and the supplementation of 2% glycerol (GLY) to extenders based on ultra-heat-treated skimmed milk (UHT) or Tris-Tes-Glucose (TEST) on ram sperm kinetic parameters, plasma membrane integrity, acrosome integrity, mitochondrial function and fertilizing ability, over long chilling times. The results showed that for non-filtered semen, values for progressive sperm motility (%PSM), straight line velocity (VSL, mm/s) and the percentage of sperm with an intact plasma membrane/intact acrosome/a high mitochondrial function index (%IPIAHM) at all times up to 96 h of chilling were higher when the UHT extender (P < 0.01) was used compared to TEST extender irrespective of the presence of GLY. When semen was previously filtered with Sephadex, the addition of GLY to the UHT extender improved total motility (%TM), the %PSM and the VSL at 96 h compared to all other treatments (P < 0.01). The best results of all were obtained with nonfiltered semen and UHT either with or without GLY. Heterologous IVF using zona-intact bovine oocytes was used to assess the fertilizing capacity of non-filtered fresh (FS0), chilled-for-24 h (CS24) or chilled-for-48 h (CS48) ram semen diluted in UHT extender (GLY-free). Heterologous IVF showed that ram sperm, either FS0, CS24 or CS48, were equally capable of penetrating zona pellucida intact bovine oocytes, leading to pronuclear formation and hybrid embryo cleavage (46.3 ± 3.2; 48.8 ± 3.2; and 43.3 ± 3.5, respectively). No differences were seen with respect to fresh sperm in terms of sperm binding, penetration, polyspermy, pronucleus formation or cleavage rates (P > 0.05). In conclusion, neither Sephadex filtration nor addition of glycerol provided extra benefits to ram sperm chilled up to 96 h. Chilled, non-filtered sperm extended with UHT without GLY showed better sperm functionality than did similar sperm extended with TEST extenders. Indeed, sperm diluted in UHT extender, maintained fertilizing ability up to 48 h. |
| Resumen : | La baja fertilidad del semen de morueco almacenado en frío durante largos períodos ha fomentado el desarrollo de protocolos diseñados para mejorar el vigor cinético y la capacidad de atravezar de la barrera cervical de los espermatozoides. El presente trabajo evaluó el efecto de la selección de espermatozoides mediante la filtración de Sephadex y la suplementación de glicerol al 2% (GLY) a los diluyentes basados en leche desnatada tratada con ultra calor (UHT) o Tris-Tes-Glucosa (TEST) en parámetros cinéticos de esperma de morueco, integridad de las membranas plasmática, acrosomal y función mitocondrial y capacidad de fertilización, durante largos tiempos de enfriamiento. Los resultados mostraron que para el semen no filtrado, los valores de motilidad espermática progresiva (% PSM), la velocidad rectilínea (VSL, um/s) y el porcentaje de espermatozoides con una membrana plasmática intacta / acrosoma intacto / función mitocondrial alto (%IPIAHM) hasta por 96 h de almacenamiento en frío fue mayor cuando se usó el diluyenter UHT (P <0.01) en comparación con el diluyente TEST independientemente de la presencia de GLY. Cuando el semen se filtró previamente con Sephadex, la adición de GLY al diluyente UHT mejoró la motilidad total (% TM), el% PSM y el VSL a las 96 h en comparación con todos los demás tratamientos (P <0.01). Los mejores resultadosen el seme sin filtrar se obtuvieron con semen no filtrado y UHT con o sin GLY. Se usó FIV heteróloga utilizando ovocitos de zona intacta para evaluar la capacidad de fertilización de semen fresco no filtrado (FS0), refrigerado por 24 h (CS24) o refrigerado por 48 h (CS48) diluido en extensor UHT (sin GLY). La FIV heteróloga mostró que los espermatozoides ram, FS0, CS24 o CS48, eran igualmente capaces de penetrar en los ovocitos bovinos intactos de la zona pelúcida, lo que llevó a la formación pronuclear y la división del embrión híbrido (46,3 ± 3,2; 48,8 ± 3,2; y 43,3 ± 3,5, respectivamente). No se observaron diferencias con respecto a los espermatozoides frescos en términos de unión de esperma, penetración, polispermia, formación de pronúcleos o tasas de división (P> 0,05). En conclusión, ni la filtración con Sephadex ni la adición de glicerol proporcionaron beneficios adicionales al esperma de morueco enfriado hasta 96 h. Los espermatozoides no filtrados y enfriados diluidos con UHT sin GLY mostraron una mejor funcionalidad de los espermatozoides que los espermatozoides similares diluidos con TEST. De hecho, los espermatozoides diluidos con UHT, mantuvieron la capacidad de fertilización hasta 48 h. |
| URI : | https://www.sciencedirect.com/science/article/pii/S0093691X19301116?via%3Dihub |
| URI Fuente: | https://www.journals.elsevier.com/theriogenology |
| ISSN : | 0093691X, E-ISSN 1879-3231 |
| Aparece en las colecciones: | Artículos
|
Los ítems de DSpace están protegidos por copyright, con todos los derechos reservados, a menos que se indique lo contrario.
